لیست اختراعات سميه پويان فرد
خلاصه فرايندهاي طراحي ، توليد، تغليض و تخليص نانو ذرات T7 حامل پپتيد M2e به شرح زير مي باشد: اليگونوكلئوتيد كد كننده اكتودومن پروتئين M2 ويروس انفلوانزايي M2e)A با نرم افزار Gene Runner آناليز شده و با استفاده از نرم افزار GENEius و جدول codon usage باكتري اشرشياكلي موجود در پايگاه هاي اطلاعات ژنتيكي كدون اپتيمايز گرديد. اوليگونوكلئوتيد سنتتيك و كدون اپتيمايز شده مذكور در بين دو بازوي ژنومي باكتريوفاژ T7 كلون گرديد به گونه اي كه با توالي آمينو اسيدي ژن 10B توسط يك لينكر منعطف گلايسين - گلايسين - گلايسين - سرين ادغام شود. پس از آن غربالگري ، تخليص و تيتراسيون باكتريوفاژهاي توليد شده به كمك روش Plaque Assay و براساس روش Double Agar Overlay بر روي پليت هاي LB آگار انجام گرفت. نانو ذرات فاژ T7 با استفاده از آنتي بادي هاي مونوكلونال اختصاصي توسط روش هاي ELISA و Western Blot و Dot Blot و SDS-PAGE و PCR از لحاظ حضور مولكول هاي پپتيدM2e بر روي سطح نانو ذرات مورد آناليز و بررسي قرار گرفته و پس از توليد انبوه در كشت باكتري اشرشياكلي سويه BL21 مورد تخليص و تغليظ به روش PEG-NaCL و اولترافيلتراسيون با فيلترهاي 100 كيلو دالتني از جنس پلي اتر سولفون PES قرار گرفتند. نانو ذرات تخليص شده به صورت زير جلدي به موش هاي BALB/C ماده تزريق شده و پاسخ ايمني با اندازه گيري ميزان آنتي بادي هاي ضد پپتيد M2e در سرم موش هاي ايمن شده به كمك ELISA ارزيابي شد. همچنين استخراج طحال و كشت لنفوسيت ها انجام شده و پاسخ هاي ايمني سلولي اختصاصي ضد پپتيد M2e با استفاده از اندازه گيري ميزان اينترفرون گاما به روش ELISPOT در شرايط ex vivo مورد سنجش قرار گرفت. پس از تزريق زير جلدي نانو ذرات موش ها با دو تحت تيپ كاملا متفاوت از ويروس انفلوانزاي A يعني PRB)H1N1 و H3N2)X47 آلوده شده و روند كاهش وزن و بقاي آن ها اندازه گيري و ثبت گرديد. در پايان نتايج به دست آمده به كمك نرم افزار Graphpad Prism V.S و با استفاده از تست هاي آماري مناسب آناليز شدند.
موارد یافت شده: 1